ADC藥物

• 解決方案
  ADC藥物的研究沒有固定的研究方案，由于偶聯方式、藥物結構的差異化，每個ADC藥物的臨床前研究都存在著不同的挑戰和難題。尊龍凱時在ADC的臨床前一體化研究方案制定中與客戶深入交流，科研骨干將每一個案例的特點與多年實戰經驗和技術積累相結合，謹慎地將優質實驗方案與結果提交到客戶手上。
  截至2022年底，尊龍凱時承接的IND申報類生物藥大項目已經100多項，包括單抗、雙抗、多抗、ADC、病毒疫苗和融合蛋白等。 截至2024年6月底，尊龍凱時已成功助力28個ADC藥物獲批臨床，并有20多個ADC項目在研。
  Payload (50+)：DX8951f, SN-38, DM1, DM4, Exatecan, Dxd, MMAE/MMAF, Tubulysin M, PBD dimer, Seco-Duocarmycin MA, PNU159682, Doxorubicin analog等；Linker (200+): 具有多種Cleavable和uncleavable、親水性和疏水性以及新型Linker，如：Gly-Gly-Phe-Gly,VC-PAB, SMCC, N-SMP等；Payload+Linker (30+): SN-38-PEG-PAB, DXD-GlyGlyPheGly, DXD-VCPABDM1-SMCC, DM1-SPP, DM4-SPDB, MC-VC-PAB-MMAE/MMAF, MC-Val-Ala-PBD, VC-PAB-Dolastatin 10等；尊龍凱時已完成毒素小分子：DM1，MMAE、Exatecan、Dxd，SN38等；尊龍凱時已完成靶點：Her2、Her3、Trop2、Claudin 18.2、CD33、Muc1、FR等；尊龍凱時有著開發并驗證針對不同靶點分析方法的豐富經驗，能夠有效根據需求分析靶點的表達水平、以及靶點可及性，為靶點的選擇提供建設性意見。

• ADC Payloads 合成
  尊龍凱時的化合物庫中有多種不同作用機制的化學ADC payload分子供客戶備選，同時可以定制合成客戶所特定需要的一種或幾種ADC抗腫瘤化學藥物。
  尊龍凱時的ADC payloads分子庫可以有效解決細胞毒素的選擇難題，在ADC payloads分子庫中有尊龍凱時藥物發現團隊積累了多種不同作用機制、不同種類的細胞毒素可供客戶選擇，同時可以定制合成客戶所需要的一種或幾種ADC細胞毒素，滿足數量上的需求。通過自研和對外合作，尊龍凱時可以提供所有已經上市ADC藥物的6種毒素可以提供已經上市ADC中毒素的衍生物達20種以上可以合成自研類毒素。微管蛋白抑制劑/穩定性破壞劑DNA合成抑制劑拓撲異構酶抑制劑和RNA聚合酶II抑制劑
  推薦閱讀：一文讀懂：抗體偶聯藥物（ADC）
• ADC偶聯策略
  ADC 的三個主要組成部分是抗體 (Antibody)、連接子 (Linker) 和有效載荷 （Payload）。
  抗體負責靶向結合，可以是單克隆抗體、Fab抗體、雙特異性抗體或納米抗體。連接子連接抗體和payload。分為可切割和不可切割兩種類型。連接子是ADC穩定性的關鍵，負責何時釋放有效載荷。Payload通常是一種具有明確作用機制的高活性毒素分子。對腫瘤細胞具有一定的殺傷作用。
  基于半胱氨酸的ADC偶聯
  提供5 mg、50 mg、500 mg等抗體量級的偶聯服務，實驗周期：2-4周。QC方法包括SEC、HIC、LC-MS/MS等。DAR值≈4。提供其它偶聯方法的開發服務。
• ADC藥物體外研究
  尊龍凱時擁有300種以上的腫瘤細胞系，多種可供選擇的ADC靶蛋白表達陽性和陰性的腫瘤細胞。并且提供靶點過表達細胞系構建服務，可以為客戶提供多種已知靶點的旁觀者效應分析服務。此外，尊龍凱時生物團隊擁有豐富的細胞標記經驗及基于FACS的細胞活力分析能力。

  ADC結合能力測試

  A: 將HER2 ADC (BB-1701和DS-8201) 與N87細胞共孵育，然后進行FACS分析。
  B：將HER2蛋白固定在M5芯片上，將DS-8201梯度稀釋后注入芯片，通過Biacore 8K分析HER2和DS-8201的結合親和力。
  流式細胞術分析ADC與抗原表達細胞的結合能力（圖A：HER-2 ADC DS-8201、BB-1701與BT-474細胞結合能力測試）。        SPR分析ADC與抗原蛋白的結合能力（圖B：DS-8201與HER2蛋白結合測試）。        提供ELISA, HTRF等其它方法的結合能力測試。
  ADC內吞實驗
  OVCAR-3 細胞與 FITC 標記的 ADC 孵育 24 小時，再與 Lyso-Tracker 和 DAPI 一起孵育，然后通過共聚焦顯微鏡進行分析。
  尊龍凱時可提供ADC熒光標記服務 (如ADC-FITC，ADC-Cy5等）。        利用共聚焦顯微鏡分析抗體內吞（與溶酶體標記lyso-tracker共染色分析內吞部位）。        利用熒光Western或流式分析內吞效率。
  細胞毒性測試
  ADC, 裸抗及payload與靶細胞共孵育，通過CCK-8、CTG、MTT等方法測試各個待測物對腫瘤細胞的毒性。
  （圖：ADC,裸抗及payload對NCI-N87及HCT116細胞的生長抑制曲線）
  細胞周期檢測
  MV-4-11細胞(人髓性單核細胞白血病細胞)和PC-3細胞(人前列腺癌細胞)用Compound A處理并用PI染色，進行基于FACS的細胞周期分析。數據顯示Compound A顯著阻斷MV-4-11細胞周期，對PC-3細胞沒有太大影響。說明Compound A具有適應癥特異性。
  細胞凋亡實驗
  MV-4-11細胞用Compound A處理并使用 PI/Annexin V染色，然后進行 FACS 分析。數據顯示Compound A促進MV-4-11細胞凋亡。
• ADC藥理學研究
  靶抗原結合活性         靶抗原相關藥理作用 (如:ADCC，CDC)         小分子化合物及活性代謝產物的作用機制(關注ADC與裸抗、游離小分子化合物或藥理活性代謝物之間的藥理作用差異，以及抗原表達水平對藥理作用的影響)         內化、裝解以及裂解后主要的游離小分子化合物的效應
• ADC 藥效學評價
  ADC的動物體內藥效試驗是ADC研究中一項重要的藥理參數，它直接反映了ADC的功效并影響臨床試驗設計。尊龍凱時致力于為客戶提供成熟的評估ADC體內藥效的腫瘤模型，在AAALAC認證的環境下完成模型動物的建模和飼養，并以GLP-like的高標準完成相關藥效學評價試驗。
  目前尊龍凱時已建立六大類近300種的腫瘤評價模型，能覆蓋大部分常規腫瘤疾病。     ADC藥物評價模型: 轉基因模型、異種腫瘤移植模型、同種腫瘤移植模型、PDX模型、人源化腫瘤移植模型、原位移植模型。     多種實驗動物：嚙齒類（小鼠/大鼠、兔子）；非嚙齒類（比格犬、小型豬、非人靈長類動物）。
  通過MC-VC-PAB或PY-VC-PAB連接子使純化的人源化抗EGFR單克隆抗體(RC68）與MMAE偶聯生成RC68-MC-VC-PAB-MMAE和RC68-PY-VC-PAB-MMAE。RC68-MC-VC-PAB-MMAE和RC68-PY-VC-PAB-MMAE的體內抗腫瘤活性檢測通過尊龍凱時進行。BALB/c裸鼠皮下移植H125細胞，當腫瘤長到 100-300 mm3 時，將小鼠隨機分組并每周用指定藥物進行靜脈給藥。通過測量腫瘤體積和小鼠體重從而衡量每種藥物對的影響。10 mg RC68-MC-VC-PAB-MMAE或RC68-PY-VC-PAB-MMAE 給藥處理后顯著抑制小鼠H125腫瘤的生長，且不影響小鼠體重。
• ADC 藥代動力學評價
  由于ADC藥物組成成分復雜，其PK特性必須借助多個分析物的評估，因此增加了分析的難度。尊龍凱時在ADC藥物的體內分析中為各種ADC組分分析物提供了多種高質量的測試方法，通過分析動物體內采集的血漿/血清樣本，為客戶提供可靠優質的PK數據。

  待測物	描述	常用分析方法
  Conjugated Antibody	至少偶聯一個藥物的抗體	LBA
  Total Antibody	全部偶聯、部分偶聯以及未偶聯的抗體	LBA
  Small Molecules	游離或被釋放的藥物小分子及其代謝物	LC-MS/MS
  ADA	可特異性結合ADC分子及其部分結構的抗體	LBA

• 藥代及毒代測試

• ADA免疫原性的測定

• 開發優質穩定的分析方法，最終能得到ADC和總抗體相關性很好的試驗結果。

  對標國際實驗標準，與美國實驗室得出結論高度一致。

  得益于先進的實驗設備和優質穩定的分析方法，不僅能夠對標國際實驗標準，得到與美國實驗室結論高度一致的結果，而且最終能得到ADC和總抗體相關性很好的試驗結果。

• 免疫原性測試是生物藥的重要測定指標，需在研究的各個階段全程把控。生物藥的免疫原性可能會導致ADC在體內的快速清除，影響其PK特征和相關的分析。不僅如此，免疫原性可能還影響到ADC藥物的有效性和安全性。

  為確保ADC藥物抗體篩選結果的精準性和有效性，尊龍凱時免疫原性研究四大平臺為抗體免疫原性的檢驗提供了多種技術方案，最大程度滿足客戶的不同需求。

  尊龍凱時免疫原性研究四大平臺：

• 一站式整包服務
  所有研究均在同一園區內實驗室有序完成，切實保證實驗進度和項目溝通的高效性，占據數據獲取和評估的行業優越性。
• 數次成功的研究經驗
  ADC藥物組成相對復雜且目前尚無針對ADC 藥物的指導原則，所以從降低研發風險角度考慮，選擇有臨床前研究經驗的研發合作伙伴，就顯得尤為重要。
• 尊龍凱時特色研究平臺
  蛋白質/抗體藥代動力學研究平臺生物技術藥物非人靈長類安全評價專業技術服務平臺同位素藥物代學研究專業技術平臺

• 常用的單克隆抗體(McAb)制備技術

  (1) 雜交瘤技術，包括嵌合抗體制備技術

  (2) 篩庫，包括噬菌體、抗體庫技術和核糖體展示技術

  (3) 基因小鼠制備抗體技術

  (4) 單細胞篩選技術

  
  

• 尊龍凱時助力的ADC藥物研發項目有哪些？

  截至2024年8月，尊龍凱時已成功助力28個ADC藥物獲批臨床，包括：

  Muc1 ADC

  2021年6月，多禧生物用于治療晚期實體瘤的1類ADC藥物注射用重組人源化抗MUC1單抗-Tub201偶聯劑獲批臨床。這是國內首款獲批臨床的Muc1-ADC藥物。尊龍凱時在Muc1新藥研發中，提供了包括藥效、藥代及安全評價等全套臨床前研究服務，助力項目成功獲批臨床。

  DXC007

  2021年12月，多禧生物DXC007項目成功獲批臨床試驗。該藥適應癥為成年人中最常見的急性白血病——復發/難治急性髓系白血?。ˋML）。在DXC007的研發中，尊龍凱時提供了包括藥代、安全評價及SEND轉化服務，助力項目成功獲批臨床。在藥代試驗中，尊龍凱時為DXC007的各種ADC組分分析物提供了多種高質量的測試方法和可靠優質試驗數據。在安全性評價試驗中，尊龍凱時毒理研究部遵循ICH指導原則S6和S9，結合DXC007項目具體情況，定制了個性化安全性評價方案，為其提供符合NMPA、FDA等國際GLP標準的安全性評價服務。

  BAT8006

  2022年4月，百奧泰注射用BAT8006獲批臨床，用于治療晚期實體瘤。這是首款國產進入臨床的靶向葉酸受體α（FRα）的ADC。BAT8006由重組人源化抗FRα抗體與毒性小分子拓撲異構酶I抑制劑，通過自主研發的可剪切連接子連接而成。BAT8006體內外藥理研究中都表現出高效的抗腫瘤活性，同時具有很好的穩定性和安全性，血漿中釋放的毒素小分子極低，降低了脫靶毒性的風險。尊龍凱時科研骨干依托成熟的ADC臨床前研發服務平臺，汲取多年在ADC藥物臨床前研發領域的實戰技術和經驗，遵循ICH指導原則S6和S9，結合BAT8006項目的具體情況，為其定制了個性化的安全性評價方案，攻克了藥物抗體比(DAR)、穩定性帶來的復雜性和多樣性等難題，全力保障BAT8006安全性評價試驗高效、高質的研發，為其順利獲批臨床提供了專業保障。

  KM501

  2023年3月，軒竹生物及其旗下全資子公司軒竹康明生物KM501獲得臨床試驗批件。KM501是全球首個完全敲除巖藻糖的雙抗ADC藥物，適用于治療HER2陽性/表達、擴增或突變的局部晚期/轉移性實體瘤，包括HER2低表達的相關晚期腫瘤。KM501為靶向HER2兩個不同結構域雙特異性抗體ADC偶聯物。尊龍凱時作為軒竹生物的合作伙伴，為KM501提供了符合GLP規范的臨床前研究服務，包括藥代動力學研究和安全性評價。

  HB0052

  2023年11月，華奧泰收到美國FDA通知，同意公司研發的靶向CD73抗原的第三代ADC項目HB0052進入臨床試驗，這是華奧泰生物首款獲得FDA批準進入臨床的ADC項目。HB0052是基于華奧泰抗體偶聯藥物平臺研發的首款以拓撲異構酶抑制劑為載荷的First-in-Class創新型免疫抑制靶點的ADC，具有雙重抗腫瘤機制，在多個實體瘤適應癥具有應用潛力。作為華奧泰的合作伙伴，尊龍凱時依托抗體藥物偶聯物研發服務平臺及其專業的技術能力和豐富的項目經驗，為HB0052的研發提供了符合GLP規范的藥代、安評試驗，保障項目高質高效推進。

  SIBP-A17

  2024年2月，國藥集團中國生物上海生物制品研究所自主研發的第二款I類創新型ADC藥物 SIBP-A17獲得國家藥品監督管理局臨床試驗批準通知書。該產品擬用于在晚期惡性實體瘤患者中開展臨床試驗。尊龍凱時作為上海生物制品研究所的合作伙伴，為SIBP-A17的研發提供了藥代動力學和安全性評價等臨床前研究服務。這是尊龍凱時在ADC領域助力研發成果快速落地的又一個成功案例。

  T320

  2025年3月5日，山西納安生物科技股份有限公司宣布，其自主研發的T320-ADC新藥同時獲得中國國家藥品監督管理局（NMPA）、美國食品藥品監督管理局（FDA）及澳大利亞治療商品管理局（TGA）的臨床試驗批件。尊龍凱時作為納安的合作伙伴，為T320提供了藥效、藥代、安評以及生物學等臨床前研究服務。

• 所有研究均在同一園區內實驗室有序完成，切實保證實驗進度和項目溝通的高效性，占據數據獲取和評估的行業優越性。