為了進行離體(invitro)研究，必須先將目的蛋白質從其他細胞組分中分離提純出來。這一過程通常從細胞裂解開始（對于分泌性蛋白質的提純則不需要裂解細胞），通過破壞細胞膜將細胞內含物釋放到溶液中，從而獲得含有目的蛋白質的細胞裂解液。然后通過超速離心將細胞裂解液中膜脂和膜蛋白、細胞器、核酸以及含有可溶蛋白質的混合物。

對于天然蛋白質，可能需要一系列的純化步驟才能獲得純度足以用于實驗室應用的蛋白質。為了簡化這一過程，通常采用基因工程的手段在目的蛋白質上添加一些化學特性，在不改變其結構和生物學活性的情況下使純化過程更為簡單。通常是將含有特定氨基酸序列的“標簽”連接在目的蛋白質的N-端或C-端。例如，含有連續多個組氨酸的序列，稱為組氨酸標簽；將含有帶組氨酸標簽蛋白質的裂解液流過含有鎳的親和層析柱，組氨酸就可以與鎳螯合從而結合在柱子上，而裂解液中其他蛋白質由于沒有組氨酸標簽而直接流出柱子，從而達到分離目的。通過基因工程（即DNA重組）改造而獲得的蛋白質被稱為重組蛋白質。

蛋白質的分離純化方法

（1）根據分子大小不同進行分離純化。蛋白質是一種大分子物質，并且不同蛋白質的分子大小不同，因此可以利用一些較簡單的方法使蛋白質和小分子物質分開，并使蛋白質混合物也得到分離。根據蛋白質分子大小不同進行分離的方法主要有透析、超濾、離心和凝膠過濾等。

（2）根據溶解度不同進行分離純化。影響蛋白質溶解度的外部條件有很多，比如溶液的pH值、離子強度、介電常數和溫度等。但在同一條件下，不同的蛋白質因其分子結構的不同而有不同的溶解度，根據蛋白質分子結構的特點，適當地改變外部條件，就可以選擇性地控制蛋白質混合物中某一成分的溶解度，達到分離純化蛋白質的目的。常用的方法有等電點沉淀和pH值調節、蛋白質的鹽溶和鹽析、有機溶劑法、雙水相萃取法、反膠團萃取法等。

（3）根據電荷不同進行分離純化。根據蛋白質的電荷即酸堿性質不同分離蛋白質的方法有電泳和離子交換層析兩類。電泳是在外電場的作用下，帶電顆粒（如不處于等電點狀態的蛋白質分子）將向著與其電性相反的電極移動的現象。聚丙烯酰胺電泳是一種以聚丙烯酰胺為介質的區帶電泳，常用于分離蛋白質。離子交換層析是以離子交換劑為固定相，依據流動相中的組分離子與交換劑上的平衡離子進行可逆交換時結合力大小的差別而進行分離的一種層析方法。

（4）利用對配體的特異親和力進行分離純化。親和層析是利用蛋白質分子對其配體分子特有的識別能力建立起來的一種有效的純化方法。近年來，親和層析技術被廣泛應用于融合蛋白的分離純化上，因為融合蛋白具有特異性結合能力。但是在實際工作中，很難用單一方法實現蛋白質的分離純化，往往要綜合幾種方法才能提純出一種蛋白質。理想的蛋白質分離提純方法，要求產品純度和總回收率越高越好，但實際上兩者難以兼顧。隨著生物分離技術的發展、新的生物分離技術的不斷出現，為蛋白質的分離純化提供了許多新的方法和途徑。

蛋白純化技術（聯系更多服務項請發郵件到：marketing@www.msjidi.com）

分類選項：12-Tube Magnet 用于在1.5 ml或2 ml管中分離磁性顆粒

詳細信息：12-Tube Magnet可用于6xHis-tagged蛋白磁捕獲實驗，或配合Ni-NTA Magnetic Agarose Beads用于純化實驗。該磁塊由12個強力的NdFeB（釹鐵硼）磁盤組成。每個磁盤可吸引相鄰孔中的1.5 ml或2 ml管中的磁珠。捕獲6xHis-tagged蛋白后，磁珠被吸到管子的一端，這時可更換緩沖液。磁珠可遠離磁場進行重懸，實現徹底洗滌。

分類選項：15 ml/50 ml Tube Magnet 用于分離5 x 15 ml或3 x 50 ml管中的磁性顆粒

詳細信息：15 ml/50 ml Tube Magnet是一個方便的分離裝置，適用于在15 ml或50 ml管中分離細胞、磁捕獲或與BioMag磁珠配合進行免疫分析。磁珠在磁場作用下被吸到管的一端，吸引力大于20 megaoersted，在更換或倒出緩沖液時磁珠會停留在被吸引的位置。去除磁場后可便利的重懸磁珠。

分類選項：Albumin Affinity Cartridges 用液相色譜體系去除人類和小鼠血漿和血清樣本中的白蛋白

詳細信息：有效去除白蛋白，有助于低豐度蛋白的分析
使用固定的單克隆抗體對高豐度蛋白進行高特異性的去除
新型設計濾筒，操作方便快速
Albumin Affinity Cartridges預裝有結合在樹脂上的固定單克隆抗體，可利用液相色譜原理，去除人類和小鼠血漿和血清樣本中的白蛋白。有助于富集低豐度蛋白，進行分析。
操作流程：稀釋的樣本緩慢流過濾筒，在此過程中白蛋白與樹脂上固定的單克隆抗體結合。流出液中的血漿或血清蛋白不含白蛋白，此流出液可收集以備分析之用。如果需要，可使用pH值為2的甘氨酸緩沖液將白蛋白和相關蛋白從樹脂上洗脫。
應用：Albumin Affinity Cartridges可快速、特異性去除人類或小鼠血漿和血清樣本中的白蛋白，有助于低豐度蛋白的分析。

分類選項：Albumin/IgG Depletion Cartridge 用液相色譜體系去除人類血清和血漿中的IgG和白蛋白

詳細信息：有效去除人類血漿和血清樣本中的IgG和白蛋白
有助于低豐度的血漿或血清蛋白的分析
固定的單克隆抗體高特異性去除IgG和白蛋白
新型設計濾筒，操作方便快速
Albumin/IgG Depletion Cartridges預裝有結合在樹脂上的固定單克隆抗體，可利用液相色譜去除人類血漿和血清樣本中的白蛋白和IgG。有助于富集低豐度蛋白，進行分析。
操作流程：稀釋的樣本緩慢流過濾筒，在此過程中白蛋白和IgG與樹脂上固定的單克隆抗體結合。流出液中的血漿或血清蛋白不含白蛋白和IgG，收集流出液以備分析之用。如果需要，可使用pH值為2的甘氨酸緩沖液將白蛋白、IgG和相關蛋白從濾筒中的樹脂上洗脫。
應用：Albumin/IgG Depletion Cartridges可快速、特異性去除人類血漿和血清樣本中的白蛋白和IgG，有助于低豐度蛋白的分析。

分類選項：Allprotect Tissue Reagent 迅速穩定組織中的DNA、RNA和蛋白質

詳細信息：無需液氮或干冰
立即方便地穩定收集到的組織
可長期儲存組織，用于后續分析
標準的樣本制備流程，用于系統生物學研究
Allprotect Tissue Reagent可在室溫下立即穩定組織樣本中的DNA、RNA和蛋白質。這樣可以穩定DNA、RNA和蛋白質，以保證可靠的下游分析。穩定后的組織可在15–25°C運輸7天，2–8°C儲存長達12個月，在–20°C或–80°C可儲存更長時間。
操作流程：稀釋的樣本緩慢流過濾筒，在此過程中白蛋白和IgG與樹脂上固定的單克隆抗體結合。流出液中的血漿或血清蛋白不含白蛋白和IgG，收集流出液以備分析之用。如果需要，可使用pH值為2的甘氨酸緩沖液將白蛋白、IgG和相關蛋白從濾筒中的樹脂上洗脫。
應用：Albumin/IgG Depletion Cartridges可快速、特異性去除人類血漿和血清樣本中的白蛋白和IgG，有助于低豐度蛋白的分析。

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蛋白純化服務蛋白質純化方法蛋白質分離與純化技術

常用蛋白表達系統——優缺點、應用領域返回來自鼠疫致病的毒素有可能成為抗癌藥物

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蛋白分離純化方法