隨著生物技術(shù)和基因工程領(lǐng)域的不斷發(fā)展，小核酸藥物的研發(fā)熱度持續(xù)增加。許多制藥公司、科研機(jī)構(gòu)和學(xué)術(shù)界都在積極投入進(jìn)行小核酸藥物的研究和開(kāi)發(fā)。小核酸藥物相較于傳統(tǒng)藥物，具有許多優(yōu)勢(shì)：能夠?qū)崿F(xiàn)高度的靶向性，研發(fā)周期相對(duì)較短，可以用于治療各種疾病，如癌癥、遺傳性疾病、病毒感染等，具有廣泛的應(yīng)用前景。目前，全球已有19款小核酸藥物獲批上市。

小核酸藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中的質(zhì)量學(xué)研究是非常重要的一環(huán)，質(zhì)量學(xué)研究主要涉及到以下幾個(gè)方面：合成工藝，穩(wěn)定性研究，制劑開(kāi)發(fā)，雜質(zhì)檢測(cè)和控制、藥代動(dòng)力學(xué)、毒性學(xué)方面的研究。需要確保在整個(gè)研發(fā)過(guò)程中保持一致的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，以確保最終研發(fā)的藥物產(chǎn)品符合相關(guān)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和法規(guī)要求。

近期，尊龍凱時(shí)云講堂特邀工藝分析部主任杜建博士為大家解讀小核酸藥物質(zhì)量研究的相關(guān)指導(dǎo)原則，介紹小核酸藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定，以及方法開(kāi)發(fā)和驗(yàn)證，并將通過(guò)尊龍凱時(shí)【核酸藥物研發(fā)服務(wù)平臺(tái)】的豐富案例，解析小核酸藥物質(zhì)量研究的注意事項(xiàng)。本文為大家整理了直播中的高頻提問(wèn)，希望能夠幫助或減少研發(fā)中的苦惱和困惑。

歡迎觀看文章下方“視頻回放”，回顧杜建博士的整場(chǎng)分享。

問(wèn)：核酸單體的方法開(kāi)發(fā)有何特別之處？

答：核酸單體和小分子在某些方面有相似之處，比如在檢測(cè)項(xiàng)目和標(biāo)準(zhǔn)制定方面可以參考小分子的相關(guān)經(jīng)驗(yàn)。然而，核酸單體中存在著一些特殊雜質(zhì)，需要在方法開(kāi)發(fā)時(shí)盡可能地分離這些未知的雜質(zhì)。此外，對(duì)核酸單體純度的要求更高，以避免任何未知或已知雜質(zhì)通過(guò)合成過(guò)程帶入最終的核酸API中。因此，在質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定方面也會(huì)有一些不同之處。核酸藥物開(kāi)發(fā)中這些細(xì)微之處需要特別關(guān)注，以確保最終產(chǎn)品的質(zhì)量和安全性。

問(wèn)：為什么用MDBA后色譜柱柱效會(huì)變差？

答：色譜柱在色譜分析中起著重要作用，但它與其他參數(shù)如流速和梯度等相互影響，是一個(gè)綜合效果。在優(yōu)化過(guò)程當(dāng)中，僅僅調(diào)整色譜柱對(duì)于良好的峰形和分離度并不能得到兼顧，只有在適當(dāng)調(diào)整流速和離子堆濃度后，才能實(shí)現(xiàn)峰形和分離度的綜合提高。因此優(yōu)化色譜分析過(guò)程需要綜合考慮各種參數(shù)的調(diào)整，才能達(dá)到最佳的分析效果。

問(wèn)：在純度方法，硫代后峰形已存異常問(wèn)題的峰形有沒(méi)有一定要求修好？

答：如果能夠修好的話肯定是最好，因?yàn)樗旧砭褪且阎碾s質(zhì)的話，最好峰形能夠達(dá)到比較好的期限分離，那是最理想的情況。其次的話，如果說(shuō)已經(jīng)做了一系列的優(yōu)化，包括流速、梯度和更換色譜柱等操作仍無(wú)法解決問(wèn)題，那么不一定非要追求完美的峰形。不一定非要按照小分子的思路，必須讓峰形做得很完美。只要不特別影響低濃度分析，也是可以接受的。這個(gè)問(wèn)題確實(shí)需要根據(jù)具體情況進(jìn)行綜合考慮，需要根據(jù)不同項(xiàng)目的特點(diǎn)、譜圖以及實(shí)際情況進(jìn)行平衡取舍。

問(wèn)：?jiǎn)捂溣嘘P(guān)物質(zhì)方法開(kāi)發(fā)專屬性，主峰如何確認(rèn)未包含有雜質(zhì)，請(qǐng)問(wèn)是和跟小分子一樣看紫外光譜純度嗎？

答：在確定正義鏈或反義鏈中的n+1、n-1或其他雜質(zhì)是否包含在主峰內(nèi)時(shí)，通常無(wú)法通過(guò)紫外（UV）檢測(cè)來(lái)確認(rèn)，因?yàn)樗鼈兊淖贤忭憫?yīng)相似。更有效的方法是通過(guò)質(zhì)譜（MS）分析和鑒別，觀察其質(zhì)譜圖，并通過(guò)優(yōu)化分析方法嘗試將n-1或n+1的雜質(zhì)從主峰中分離出來(lái)。

另一種方法是請(qǐng)工藝同事合成一些n+1、n-1或其他類型的雜質(zhì)，如營(yíng)養(yǎng)雜質(zhì)、硫代雜質(zhì)等，以便更直觀地開(kāi)發(fā)分析方法，并確定主峰內(nèi)是否包含這些雜質(zhì)。如果工藝無(wú)法合成這些雜質(zhì)，可以考慮獲取這些雜質(zhì)的對(duì)照品，從分析的角度來(lái)說(shuō)，這是最佳方法用于方法開(kāi)發(fā)和確認(rèn)。

問(wèn)：定量限低于報(bào)告限和鑒定限可以接受嗎？

答：正常情況下，定量限肯定要高于鑒定限和報(bào)告限，不可能是報(bào)告限比定量限還高，或者鑒定限比定量限高的情況。舉例來(lái)說(shuō)，對(duì)于核酸藥物而言，鑒定限為1.0，定量限為1.5。不能將未知雜質(zhì)的鑒定限設(shè)定在1.5，然后將其定量限設(shè)定在1.6，這違反了正常邏輯。正常情況下，定量限應(yīng)該高于鑒定限。

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