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環肽藥物作為醫藥領域的一顆冉冉升起的新星，其獨特的結構和卓越的功能引起了全球科研人員的廣泛關注。這些環狀分子以其高穩定性和選擇性，為治療多種疾病提供了新的治療策略。在環肽藥物的研究中，基因編碼展示技術和mRNA display技術發揮了重要作用。

mRNA display技術的應用范圍廣泛，不僅包括多肽和蛋白質適體的發現，還涵蓋了蛋白質相互作用機制的深入闡明和分析，為環肽藥物的研究提供了強有力的技術支持。

尊龍凱時云講堂邀請生物部高級研究員/項目經理劉超博士為您解答環肽藥物研發中常見的問題，一起看看吧！

點擊鏈接：http://www.msjidi.com/video/cyclic-peptide.shtml，觀看劉超博士云講堂內容！

1 篩選獲得的大環肽有重復的序列嗎？

劉超博士：確實存在這樣的情況。在我們的測序分析中，我們發現了一些重復的序列。有時，這些重復可能意味著某個序列被多次篩選出來，導致拷貝數增加。可能有三個或四個序列指向同一個大環肽。對于這些具有相同序列的情況，我們將在后續的SPR驗證或合成過程中給予重點關注。

2 如果可以提供靶點蛋白，我必須攜帶列出來的GST或者Fc標簽嗎？是否能換成其他的純化標簽嗎？

劉超博士：可以通過下圖看到文庫的基本信息，環肽本身帶有His標簽的，標簽是為了輔助環肽的提純過程，除了His標簽之外，其他各種標簽也可用于靶點蛋白的純化。這些靶點蛋白上的標簽的關鍵作用是固定靶點蛋白，確保其在實驗過程中的穩定地固定在beads上。

3 想問一下mRNA的環肽展示技術可以和生物合成相結合?利用植物中的環化酶去環化？

劉超博士：可以的，環化酶是通過兩個環肽，類似直播中提到的半胱氨酸成環的。在我們實驗室，環化是通過化學方法進行的，確保了環肽的完整性和功能性。環化完成后，我們會進行純化步驟，以確保獲得的環肽是完整且可以順利結合的。這一純化過程對于保證環肽的質量和活性至關重要，確保了我們能夠提供高質量的環肽產品。

4 你們如何進行QC檢測的？

劉超博士：我們采用的是高通量測序技術，目前還在開發LC-MS的方法。在實驗的早期階段，我們通過銀染技術進行定性分析，以確保翻譯過程中多肽的生成和翻譯的順利進行。在mRNA/cDNA與大環肽共軛物階段，我們利用二代高通量測序技術，這有助于在篩選前確保文庫的質量，并提供更準確可靠的數據。

5 請問通常mRNA篩選一輪需要多久？

劉超博士：從DNA文庫到完成篩選和測序的整個流程，我們預計需要大約5至6周的時間。這個時間框架主要是由于文庫測序階段相對較長，大約需要兩周左右。實際上，如果只考慮操作過程，完整的操作可以在兩周內完成。

如果您對于新藥研發臨床前研究過程中有一些困惑或者想要深入了解的專題內容，可以留下您的問題和建議，尊龍凱時希望和您一起，探索新藥研發的奇妙世界。

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