Caco-2滲透性測(cè)試（Caco-2 Permeability Assay）是一種常用的體外實(shí)驗(yàn)方法，用于評(píng)估化合物在人體腸道中的吸收程度和滲透性。當(dāng)藥物通過(guò)口服途徑給予時(shí)，藥物的吸收程度和滲透性是重要的藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)。

基于人類(lèi)結(jié)腸癌細(xì)胞株Caco-2的特性，可以通過(guò)模擬小腸上皮細(xì)胞層的情況，來(lái)預(yù)測(cè)化合物的口服生物利用度。在Caco-2細(xì)胞培養(yǎng)在滲透聚碳酸酯膜上時(shí)，能夠形成一個(gè)單層上皮細(xì)胞，可以用于模擬人腸上皮細(xì)胞的的形態(tài)，形成頂膜側(cè)(apical,AP)和基底外側(cè)(basolateral,BL)結(jié)構(gòu)，能在頂膜表面分化出刷狀緣絨毛。與PAMPA（平行人工膜滲透試驗(yàn)）相比，Caco-2細(xì)胞具有通量較低，成本較高的特點(diǎn)，然后Caco-2細(xì)胞可以同時(shí)快速篩選大批量藥物，所需要的藥量較少，相比動(dòng)物模型而言，是相對(duì)經(jīng)濟(jì)省時(shí)的選擇。并且，coca-2可以表達(dá)腸道轉(zhuǎn)運(yùn)體和酶，有可能預(yù)測(cè)主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)和有多種轉(zhuǎn)運(yùn)體的藥物相互作用。

推薦閱讀：什么是Caco-2細(xì)胞模型？

以下為Caco-2細(xì)胞滲透性試驗(yàn)的一般步驟：

(1) 首先前處理需要將Caco-2細(xì)胞培養(yǎng)在多孔透明的培養(yǎng)膜上，形成一個(gè)細(xì)胞單層，通常需要14-28天。在培養(yǎng)過(guò)程中，確保Caco-2細(xì)胞達(dá)到一定的分化程度，以更好地模擬腸上皮細(xì)胞層。

(2) 將待測(cè)的化合物加入到HBSS中，讓其與Caco-2細(xì)胞接觸。

(3) 讓細(xì)胞在孵育箱中以恒定的溫度、濕度和CO2濃度下培養(yǎng)一段時(shí)間，通常為2小時(shí)。

(4) 在孵育結(jié)束后，分別收集上層液（在細(xì)胞上方）和下層液（通過(guò)細(xì)胞層進(jìn)入孔隙膜下方）。

使用合適的技術(shù)，例如高效液相色譜法（HPLC）或液相質(zhì)譜聯(lián)用法（LC-MS），測(cè)量樣品中化合物的濃度。

(5) 通過(guò)比較上層液和下層液中化合物的濃度，計(jì)算化合物的透過(guò)率、吸收速率以及其他相關(guān)參數(shù)。藥物在 Caco-２細(xì)胞單層模型中的表觀滲透系數(shù)（apparent permeability coefficient ，Papp ）的計(jì)算：Papp=dCr/dt×Vr×1/A ×1/C０。 Papp單位為 cm/s 。

Caco-2細(xì)胞滲透性試驗(yàn)可以提供有關(guān)化合物在模擬腸道條件下的吸收特性的重要信息。通過(guò)測(cè)量化合物通過(guò)細(xì)胞層的能力，評(píng)估其被吸收到循環(huán)系統(tǒng)中的潛力，并預(yù)測(cè)其在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為。這對(duì)于藥物研發(fā)和口服藥物的生物利用度評(píng)估非常關(guān)鍵。但是仍然需要注意，Caco-2細(xì)胞滲透性試驗(yàn)是一種體外方法，雖然能夠提供有用的參考數(shù)據(jù)，但在實(shí)際應(yīng)用中仍需要結(jié)合其他因素綜合評(píng)估化合物的吸收性能和滲透性。

尊龍凱時(shí)在藥代動(dòng)力學(xué)體外研究方面有超過(guò)十九年的相關(guān)經(jīng)驗(yàn)，可提供體外研究包含代謝穩(wěn)定性、P450誘導(dǎo)和抑制、代謝途徑研究、代謝產(chǎn)物鑒定等研究項(xiàng)目，涉及的動(dòng)物有大鼠、小鼠、兔、狗、猴子等。每年完成超過(guò)20個(gè)新藥臨床前DMPK申報(bào)研究，每年大于2000個(gè)化合物的體內(nèi)PK篩選。作為一站式綜合服務(wù)平臺(tái)，尊龍凱時(shí)致力于不斷探索先進(jìn)的技術(shù)和方法，以滿(mǎn)足客戶(hù)在探究新藥研發(fā)的需求，持續(xù)提供更高效、高性?xún)r(jià)比的研發(fā)服務(wù)助力客戶(hù)加速新藥研發(fā)進(jìn)程。賦能全球合作伙伴，聚力中國(guó)創(chuàng)新，為人類(lèi)健康貢獻(xiàn)力量！

推薦閱讀：

視頻：創(chuàng)新藥物DMPK研究概覽，以終為始！

Y08624是一種新型TRIM24/BRPF1雙重抑制劑，具有良好的Caco-2滲透性。Caco-2 滲透性測(cè)定通過(guò)尊龍凱時(shí)進(jìn)行

設(shè)計(jì)合成和評(píng)估用于治療前列腺癌的CBP溴結(jié)構(gòu)域抑制劑。PK評(píng)估、肝微粒體穩(wěn)定性測(cè)定和Caco-2滲透性測(cè)定通過(guò)尊龍凱時(shí)進(jìn)行

參考文獻(xiàn)：

1. Xiu-wei Yang, Xiao-da Yang, Ying Wang, Lian Ma, Yue Zhang, Xiao-gai Yang, Kui Wang. Establishment of Caco-2 cell monolayer model and standard operation procedure for assessing intestinal absorption of chemical components of traditional Chinese medicine. Journal of Chinese Integrative Medicine, 2007, 5(6): 634-641.

2. 王莎, 劉斯琪, 丁鵬敏, 龐月笙, 陶志, & 王如峰. (2020). 體外模型在中藥代謝研究中的應(yīng)用. PROGRESS IN PHARMACEUTICAL SCIENCES, 44(2), 119-132.

Caco-2 藥代動(dòng)力學(xué)體外研究

美研| STAT3——腫瘤研究與靶向治療的熱門(mén)候選者！返回【一期一會(huì)】8月行業(yè)會(huì)議重磅來(lái)襲

2023-07-05

Prostate cancer (PCa) is one of the most commonly diagnosed cancers and the leading cause of cancer mortalities in men. CREB (cyclic-AMP responsive element binding protein) binding protein (CBP) is a potential target for prostate cancer treatment. Researchers designed 1-(Indolizin-3-yl)ethan-1-ones as CBP bromodomain inhibitors for the treatment of prostate cancer. Pharmacokinetic properties evaluation were analyzed by Medicilon. Liver microsomal stability assay were performed at Medicilon. Caco-2 permeability assay was analyzed by Medicilon.

TRIM24和BRPF1是癌癥的潛在治療靶點(diǎn)。Y08624是一種新型TRIM24/BRPF1雙重抑制劑，具有良好的Caco-2滲透性。Caco-2 滲透性測(cè)定通過(guò)尊龍凱時(shí)進(jìn)行

2023-07-06

TRIM24 (tripartite motif-containing protein 24) and BRPF1 (bromodomain and PHD finger containing protein 1) are epigenetics “readers”and potential therapeutic targets for cancer and other diseases. Y08624 (Compound 20l) is a new TRIM24/BRPF1 dual inhibitor. Y08624 displays reasonable Caco-2 permeability. Caco-2 permeability assay was performed by Medicilon.

代碼

688202

川沙總部

地址: 上海市浦東新區(qū)川大路585號(hào)